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¿Cómo se expresan y detectan los receptores GLP-1?

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Actualmente estoy trabajando con un péptido que es un análogo de glp-1, pero durante los estudios in vitro no puedo detectar la presencia de receptores GLP1-. La línea celular utilizada es Min-6. ¿Cómo lo detecto?


La pregunta no está clara, ya que no aclara si el receptor GPL-1 es endógeno o está sobreexpresado. ¿También el GLP-1 pertenece a la misma especie de la que se origina Min-6 o pertenece a una especie diferente? Esos son puntos importantes, ya que si el receptor es endógeno, el problema principal es la sensibilidad del método de detección, que a veces puede ser difícil de detectar una proteína endógena en relación con una sobreexpresada. Además, si la GPL-1 pertenece a una especie diferente, que está tratando de sobreexpresar en Min-6, es posible que no funcione, ya que la maquinaria celular podría no soportar su producción (aunque es poco probable) o su transporte a la superficie celular, lo que ha tenido este problema antes. Podría ser que para los niveles de expresión particulares que tiene en esas células, si el GLP-1 está sobreexpresado o si no es endógeno, causa toxicidad y mata las células que lo expresan, por lo tanto, ¿por qué no ve ningún GLP? 1 expresión (por ejemplo, debido a una activación excesiva del receptor). ¿También podría aclarar lo que quiere decir con "analógico para glp-1"? ¿Significa esto que no es exactamente GPL-1 o es un homólogo u ortólogo, que está tratando de detectar utilizando un anticuerpo específico de GLP-1? eso podría volver a ser un problema si el GLP-1 Ab que está utilizando detecta una región del receptor, que no se conserva en sus homólogos.

En términos de soluciones, como se señala en los comentarios, la mejor manera de hacerlo es usar un Ab policlonal, que se levanta contra una gran sección del péptido en cuestión, lo que le permite una mejor oportunidad de detección. Si eso no funcionó, es posible que deba recurrir a la detección de ARNm de GLP-1 mediante RT-PCR o qPCR, para lo cual necesitaría diseñar cebadores basados ​​en su secuencia GPL-1, con la que puede obtener ayuda aquí.


Receptor tipo peaje

Receptores tipo Toll (TLR) son una clase de proteínas que desempeñan un papel clave en el sistema inmunológico innato. Son receptores que atraviesan la membrana de un solo paso y que generalmente se expresan en células centinela, como macrófagos y células dendríticas, que reconocen moléculas conservadas estructuralmente derivadas de microbios. Una vez que estos microbios han traspasado las barreras físicas, como la piel o la mucosa del tracto intestinal, son reconocidos por los TLR, que activan las respuestas de las células inmunitarias. Los TLR incluyen TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 y TLR13, aunque los tres últimos no se encuentran en humanos, [1] y no hay un gen para TLR10 en ratones. [2] TLR1, TLR2, TLR4, TLR5, TLR6 y TLR10 se encuentran en la membrana celular, mientras que TLR3, TLR7, TLR8 y TLR9 se encuentran en vesículas intracelulares (porque son sensores de ácidos nucleicos). [3]

Los TLR recibieron su nombre por su similitud con la proteína codificada por el gen de peaje identificado en Drosophila en 1985 por Christiane Nüsslein-Volhard y Eric Wieschaus. [4]


Linfocitos T auxiliares

La tH los linfocitos funcionan indirectamente para identificar patógenos potenciales para otras células del sistema inmunológico. Estas células son importantes para las infecciones extracelulares, como las causadas por ciertas bacterias, helmintos y protozoos. TH los linfocitos reconocen antígenos específicos que se muestran en los complejos MHC II de las APC. Hay dos poblaciones principales de TH células: TH1 y TH2. THLas células 1 secretan citocinas para mejorar las actividades de los macrófagos y otras células T. THLas células 1 activan la acción de las células T citotóxicas, así como de los macrófagos. TH2 estimulan a las células B vírgenes para destruir invasores extraños a través de la secreción de anticuerpos. Ya sea una TH1 o una THLa respuesta inmune que se desarrolla depende de los tipos específicos de citocinas secretadas por las células del sistema inmune innato, que a su vez depende de la naturaleza del patógeno invasor.

La tHLa respuesta mediada por 1 involucra macrófagos y está asociada con inflamación. Recuerde las defensas de primera línea de los macrófagos involucrados en la respuesta inmune innata. Algunas bacterias intracelulares, como Tuberculosis micobacteriana, han evolucionado para multiplicarse en macrófagos después de haber sido engullidos. Estos patógenos evaden los intentos de los macrófagos de destruir y digerir el patógeno. Cuando M. tuberculosis se produce una infección, los macrófagos pueden estimular las células T vírgenes para que se conviertan en TH1 celdas. Estas células T estimuladas secretan citocinas específicas que envían retroalimentación al macrófago para estimular sus capacidades digestivas y permitirle destruir el colonizador. M. tuberculosis. De la misma manera, THLos macrófagos activados por 1 también se adaptan mejor a la ingestión y destrucción de células tumorales. En resumen TH1 las respuestas se dirigen hacia los invasores intracelulares mientras que TH2 respuestas están dirigidas a aquellas que son extracelulares.


2. Mecanismos básicos del dolor

Fundamentalmente, el mecanismo básico del dolor sufre tres eventos: transducción, transmisión y modulación cuando hay presencia de estímulos nocivos. Por ejemplo, la transducción ocurre a lo largo de la vía nociceptiva siguiendo ese orden: (1) los eventos de estímulo se convierten en eventos de tejido químico (2) los eventos de tejido químico y hendidura sináptica luego se transforman en eventos eléctricos en las neuronas y (3) eventos eléctricos en el tejido las neuronas se transducen como eventos químicos en las sinapsis. Una vez completada la transducción, el siguiente mecanismo sería la transmisión. Tiene lugar transmitiendo los eventos eléctricos a lo largo de las vías neuronales, mientras que los neurotransmisores en la hendidura sináptica transmiten información desde una terminal postsináptica de una célula a una terminal presináptica de otra. Mientras tanto, el evento de modulación tiene lugar en todos los niveles de las vías nociceptivas a través de la neurona aferente primaria, DH y el centro cerebral superior por regulación hacia arriba o hacia abajo. Todo esto conduce a un resultado final, y la vía del dolor se ha iniciado y completado, lo que nos permite sentir la sensación dolorosa desencadenada por el estímulo. La ilustración básica sobre la transmisión del dolor se ilustra en la Figura 1.

La ruta básica de transmisión del dolor sobre estímulos nocivos en orden ascendente y descendente, y la ilustración de la transmisión sináptica en la hendidura sináptica.

2.1. Neuronas

Se sabe que las neuronas son un componente principal que conecta, recibe y procesa toda la información nociceptiva generada a partir de los tres eventos discutidos anteriormente en el SNC y el SNP. Tres tipos de neuronas que existen en nuestro cuerpo son las neuronas sensoriales (neuronas aferentes), las interneuronas (funciones para transmitir las señales entre las neuronas aferentes y eferentes) y las neuronas motoras (neuronas eferentes). Todas las neuronas son eléctricamente excitables y constan de la misma división de partes: soma, axón (mielinizados o amielínicos) y dendritas. Las neuronas están conectadas entre sí para formar redes neuronales complejas en nuestro cuerpo, donde las señales químicas y eléctricas se transmiten a través de conexiones especializadas, que se denominan sinapsis. Las señales sinápticas enviadas desde una neurona son recibidas por las dendritas y el soma (transmisión sináptica) de otra neurona, y estas señales pueden ser de naturaleza inhibidora o excitadora, definida por los efectos farmacológicos resultantes de la propia señal. Después de recibir las señales a través de las dendritas o el soma, las señales se transmiten dentro de las neuronas mediante axones. Esto conduce a breves pulsos generados dentro de la neurona, conocidos como potencial de acción, que se propagan desde el soma, viajan a lo largo de los axones para activar las sinapsis y luego se envían a otras neuronas, actuando como una vía para transportar las señales desde su fuente. a la médula espinal o al cerebro, donde finalmente se interpreta que se ejecuta una respuesta. Hay dos clasificaciones principales de neuronas especializadas: neuronas sensoriales y neuronas motoras. Las neuronas sensoriales, que se encuentran en la dermis y la epidermis y que funcionan para reaccionar al tacto similar a un estímulo, envían estas señales cuando el estímulo está presente, mientras que el trabajo principal de las neuronas motoras es recibir las señales del cerebro y la columna vertebral. cordón seguido de producir respuestas que causan contracciones musculares y afectan las salidas glandulares, como se muestra en la Figura 1. Sin la presencia de neuronas dentro del sistema nervioso para transmitir señales, nuestro cuerpo no puede reaccionar a estímulos peligrosos del entorno.

2.2. Axones

Los axones también se conocen como fibras nerviosas, que son el componente principal de una neurona que funciona para conducir potenciales de acción en una dirección unilateral desde las dendritas a las terminales axonales, así como de una neurona a otra. Los axones pueden estar en forma mielinizada o amielinada. La presencia de la vaina de mielina de un axón, conocido como nodo de Ranvier, aumenta la velocidad de propagación de los impulsos, ya que viajan a lo largo de la fibra mielinizada por conducción saltatoria (generación de potencial de acción en cada nodo de Ranvier) y actúa como un aislante para evitar que los impulsos eléctricos salgan del axón durante la transmisión. Para las fibras amielínicas, los impulsos se mueven continuamente a un ritmo mucho más lento, en comparación con los mielinizados. Para las neuronas aferentes primarias, las fibras A & # x003b4 están mielinizadas, mientras que las fibras C no están mielinizadas. Para las neuronas eferentes, la mayoría de las neuronas preganglionares están mielinizadas. Además, hay pequeños espacios entre los nodos de Ranvier. El nodo de Ranvier contiene un canal de K + y Na +, que actúa como reserva para ahorrar energía de la neurona durante la transmisión del potencial de acción. Según la velocidad de un impulso conducido, el diámetro del axón y la función de un axón, las neuronas sensoriales (aferentes) se clasifican en tres grupos principales: A, B y C, mientras que las neuronas motoras (eferentes) se agrupan en Tipo Ia, Ib, II, III y IV [2].

2.2.1. Grupo A

Erlanger y Gasser clasificaron las fibras nerviosas del grupo A como fibras mielinizadas. Puede subdividirse en A & # x003b1, A & # x003b2, A & # x003b3 y A & # x003b4 con diferentes conjuntos de características cada uno. Estas fibras terminan generalmente en las láminas I, III, IV y V de la DH de la médula espinal con alguna proyección interna de la lámina II.

Tipo A & # x003b1: tanto el Tipo Ia como el Ib de las fibras sensoriales de las terminaciones del huso muscular y el tendón de Golgi se agrupan en este tipo. Se utiliza principalmente para determinar la función propioceptiva.

Tipo A & # x003b2: es un tipo de mecanorreceptores de bajo umbral, cutáneo, de adaptación lenta o rápida, y es una fibra aferente de Tipo II del receptor de estiramiento [2]. Las fibras A & # x003b2 pertenecen a las láminas III y IV.

Tipo A & # x003b3: fibras aferentes de tipo II de los receptores de estiramiento.

Tipo A & # x003b4: es bien conocido como los nociceptores térmicos y mecánicos que terminan en las láminas rexed I y V [3]. Es una fibra aferente de tipo III [4]. Las fibras A & # x003b4 son también los nervios mielinizados más pequeños y tienen una velocidad de conducción relativamente rápida de 30 m / s. El diámetro de las fibras A & # x003b4 es de aproximadamente 2 & # x020135 & # x000b5m, y responde al dolor punzante y de corta duración.

2.2.2. Grupo B

Estos grupos de fibras nerviosas están moderadamente mielinizados con velocidades de conducción de 3 & # x0201314 m / s. Las fibras nerviosas preganglionares del sistema nervioso autónomo (SNA) y las fibras aferentes viscerales generales pertenecen a este grupo.

2.2.3. Grupo C

Las fibras nerviosas del grupo C no están mielinizadas con menos de 2 & # x000b5m de diámetro y tienen una velocidad de conducción relativamente lenta de aproximadamente 2 & # x000b5m / s. Las fibras nerviosas de las raíces dorsales (fibras aferentes de tipo IV) y las fibras posganglionares del SNA pueden clasificarse en este grupo. Todas estas fibras tienen una función principalmente nociceptiva, transportan la información sensorial y ensamblan alrededor del 70% de la información nociceptiva aferente, que luego ingresa a la médula espinal. Las fibras C terminan en las láminas I y II de la sustancia gris de la médula espinal [3]. En términos de nocicepción, los nociceptores de fibras C son polimodales, que se activan por estímulos térmicos, mecánicos y químicos. La activación de las fibras C se debe a estímulos mal localizados, como la sensación de ardor en la piel. En términos de neuroquímica, las fibras C pueden clasificarse como peptidérgicas o no peptidérgicas, y aproximadamente el 50% de estas fibras expresan neuropéptidos que incluyen péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP), neuroquininas y sustancia P (SP).

Generalmente, los impulsos eléctricos que viajan a lo largo de los axones pueden proyectarse de dos formas: las fibras nerviosas aferentes o eferentes. En el SNP, las fibras nerviosas aferentes se denominan neuronas sensoriales, de las cuales los axones transportan la información sensorial desde las regiones del cuerpo a la médula espinal, mientras que las fibras nerviosas eferentes en el SNP son neuronas motoras preganglionares y posganglionares que transportan los impulsos de Las señales de movimiento motor salen de la columna a los órganos efectores periféricos, que incluyen el músculo esquelético y los músculos lisos, como se muestra en la Figura 1. En el SNP, los somas de las neuronas aferentes se encuentran en los ganglios y sus axones transmiten los impulsos eléctricos de un ganglio a otro y, finalmente, de vuelta a la columna vertebral. Los axones de las neuronas sensoriales que se encuentran en la raíz dorsal son los principales responsables de transducir la información somatosensorial mediante la interacción con los receptores somatosensoriales. Somatosensorial es una vía neuronal sensorial compleja que responde principalmente a cambios externos, a saber, estímulos táctiles superficiales, auditivos y visuales. Los receptores somatosensoriales pueden ser activados por estos diferentes estímulos que actúan sobre mecanorreceptores (incluida la propiocepción), nociceptores, termorreceptores y quimiorreceptores.

2.3. Potencial de acción

La liberación de los neurotransmisores en el axón terminal se desencadena con la entrada de Ca 2+, y las señales nociceptivas son transportadas y enviadas a través de diferentes neuronas por un potencial de acción. Hay dos potenciales principales que desempeñan funciones únicas en la producción del potencial de acción que permite la transmisión de señales a través de las neuronas. Estos se conocen como potencial de reposo y potencial umbral de las neuronas. En el axón de una neurona típica, el potencial de reposo y el potencial umbral son aproximadamente & # x0221270 y & # x0221255 mV, respectivamente. Hay más Na + acumulado fuera de la célula que K + dentro de la célula y, por tanto, el potencial de reposo de las células está cargado negativamente. El movimiento de estos iones a través de la membrana de la bicapa lipídica de las neuronas depende estrictamente de la activación de diferentes canales iónicos. La conformación de los canales iónicos puede cambiarse para activarse o desactivarse, permitiendo así la entrada o salida de iones específicos. El potencial de acción en las neuronas se ilustra en la Figura 2.

El potencial de acción en las neuronas.

Una vez que los nociceptores son estimulados por un estímulo nocivo, se generan dos tipos de potencial y se suman en el montículo axónico, los potenciales postsinápticos inhibidores (IPSP) y los potenciales postsinápticos excitadores (EPSP). Una vez que se alcanza el umbral de activación, el potencial de acción se propaga a través del axón a lo largo de las neuronas. Generalmente, el potencial de acción comienza cuando el Na + entra a través de un canal de Na + activado por voltaje (Nav), que crea la naturaleza despolarizante del potencial de membrana. Cuando se alcanza el potencial umbral, todo el Nav los canales que se encuentran en el montículo axónico se estimulan para que se abran, lo que lleva a una despolarización completa hasta alcanzar el potencial máximo (+40 mV) de las neuronas. En este punto, el Nav canales vuelven a su estado de reposo, y los canales de K + activados por voltaje (Kv) se activan y abren para permitir la salida de K +, provocando la repolarización de las neuronas. La forma del potencial de acción es estereotipada, lo que significa que la amplitud y el curso temporal de todos los potenciales de acción que ocurren en las células son los mismos. El flujo continuo de K + a través del Kv y los canales de fuga de K + hacen que el potencial de membrana se hiperpolarice, durante el período supuestamente refractario de las neuronas. Finalmente, los canales de K + se cierran y los transportadores de Na + / K + restauran el potencial de reposo al permitir la entrada de tres Na + y la salida de dos K ​​+. Cuando el potencial de acción viaja a la terminal del axón, el Ca 2+ entra en la terminal presináptica a través de los canales de Ca 2+ operados por voltaje (VOCC), lo que provoca la transmisión sináptica [5,6].

2.4. Transmisión sinaptica

Las transmisiones sinápticas son eventos químicos que se utilizan para transmitir el impulso entre neuronas. Existe una brecha entre las membranas presinápticas y postsinápticas, conocida como hendidura sináptica, donde se produce la sinapsis química. La transmisión sináptica comienza con la llegada del potencial de acción a la terminal del axón presináptico. Un potencial de acción en la terminal presináptica crea la despolarización de la membrana, lo que provoca la apertura de Nav canales en la terminal. La entrada de Na + conduce a una mayor activación del VOCC, lo que permite que Ca 2+ entre en la terminal del axón. Estos iones de calcio se unen a la proteína sensible al calcio presente en dicho terminal, que posteriormente interactúa con los componentes solubles. norteproteínas receptoras de proteína activadora del factor sensible a la etilmaleimida (SNARE). La función principal de las proteínas SNARE es promover la fusión de las vesículas sinápticas (también conocidas como vesículas de neurotransmisores) a la membrana terminal del axón presináptico en las neuronas, lo que provoca la liberación inmediata de su contenido, incluidos los neurotransmisores y el Ca 2+ en el sináptico. hendidura por exocitosis. Los neurotransmisores libres se difunden a través de la hendidura sináptica y se unen a sus canales iónicos afines activados por ligandos que se encuentran en la membrana de la neurona postsináptica adyacente, lo que provoca un potencial de acción localizado en el axón de la segunda neurona. Las señales de impulso en esta vía pueden pasar de una neurona a una dirección unilateral, como se muestra en la Figura 1.

Hay cuatro formas posibles de interrumpir la liberación de neurotransmisores. Estos métodos incluyen: (1) desvío de los neurotransmisores lejos de la hendidura sináptica después de disociarse de sus receptores (2) eliminación de los neurotransmisores por la astroglia (células gliales) que se encuentran en la hendidura sináptica (3) degradación enzimática de los neurotransmisores y ( 4) recaptación de los neurotransmisores en el axón terminal que los libera.

2.5. Ruta de transmisión del dolor

Fundamentalmente, la transmisión del dolor depende estrictamente del equilibrio de las influencias excitadoras e inhibidoras que actúan sobre los circuitos neuronales del sistema somatosensorial. Hay múltiples niveles de SNC implicados en la transmisión del dolor. Estos incluyen la médula espinal (supraespinal), el tronco encefálico (mesencéfalo, bulbo raquídeo y la protuberancia) y las regiones corticales (corteza cerebral), como se muestra en la Figura 1. Por lo general, la DH de la médula espinal desempeña un papel crucial en la integración de múltiples entradas que ingresan a la columna, incluidas las neuronas aferentes primarias y las redes de interneuronas locales, y también es responsable de las señales descendentes del centro supraespinal.

Dentro del sistema ascendente, los nociceptores aferentes primarios son responsables de transmitir la información nociva recibida a las neuronas de proyección en la DH de la médula espinal. A continuación, un subconjunto de estas neuronas de proyección, a su vez, transmite esta información sensorial hasta el tálamo y llega a la corteza somatosensorial a través del tracto espinotalámico, proporcionando así información sobre la intensidad y la ubicación del estímulo nocivo. El tracto espinotalámico se encuentra en la sustancia blanca de la médula espinal y consta de dos partes: los tractos espinotalámico lateral y espinotalámico anterior, que tienen diferentes cursos de función. El tracto espinotalámico lateral se enfoca en la transmisión del dolor y la sensación de temperatura, mientras que el tracto espinotalámico anterior transporta información relacionada con el tacto crudo y la sensación de presión firme hacia el tálamo en el cerebro.

Otras neuronas de proyección se involucran en las cortezas cingulada e insular a través de las conexiones en el núcleo parabraquial y la amígdala, contribuyendo así a las experiencias de dolor. Como se muestra en la Figura 1, esta información ascendente accede a las neuronas del gris periacueductal (PAG) y la médula ventral rostral (RVM) que se encuentra en el mesencéfalo para activar los sistemas de retroalimentación descendente, con el fin de regular la salida de la médula espinal [ 4]. La función principal del PAG es integrar la información recibida de los centros superiores del cerebro, incluidos el hipotálamo, la amígdala y el lóbulo frontal, así como recibir la entrada nociceptiva ascendente del DH. El PAG regula el procesamiento de la información nociceptiva en la DH de la médula espinal a través de las neuronas de proyección a RVM y tegmento pontino dorsolateral (DLPT). Los sistemas opioides y cannabinoides endógenos y otros neurotransmisores, como la 5-hidroxitriptamina (5-HT) y la noradrenalina (NE), se expresan en gran medida a través de las vías PAG / RVM.


Asociación entre los polimorfismos del gen del receptor de GLP-1 con el aprendizaje por recompensa, la anhedonia y el diagnóstico de depresión

Los receptores del péptido 1 similar al glucagón (GLP-1R) se expresan ampliamente en el cerebro. La evidencia sugiere que pueden desempeñar un papel en las respuestas de recompensa y la neuroprotección. Sin embargo, no se ha estudiado la asociación de GLP-1R con el diagnóstico de anhedonia y depresión. Aquí, examinamos la asociación de polimorfismos de GLP-1R con medidas objetivas y subjetivas de anhedonia, así como el diagnóstico de depresión.

Se recolectaron medidas objetivas [sesgo de respuesta evaluado por la tarea de recompensa probabilística (PRT)] y subjetivas [Escala de placer de Snaith-Hamilton (SHAPS)] de anhedonia, variables clínicas y muestras de ADN de 100 controles y 164 pacientes en el Hospital McLean. Se utilizó una muestra independiente genotipada como parte del Consorcio de Genómica Psiquiátrica (PGC) para estudiar el efecto de los supuestos polimorfismos de GLP-1R relacionados con el sesgo de respuesta en el PRT sobre el diagnóstico de depresión.

El alelo C en rs1042044 se asoció significativamente con un mayor sesgo de respuesta PRT, al controlar por edad, sexo, estado de casos y controles y discriminabilidad PRT. El genotipo AA de rs1042044 mostró un fenotipo de anhedonia más alto según las puntuaciones SHAPS. Sin embargo, el análisis de los datos del trastorno depresivo mayor de PGC no mostró asociación entre rs1042044 y el diagnóstico de depresión.

Los resultados sugieren una posible asociación de rs1042044 con anhedonia, pero no con el diagnóstico de depresión.


Inhibidores de la ECA y tormentas de citocinas

Los hallazgos también pueden generar nuevas líneas de investigación en torno a los inhibidores de la ECA. Estos medicamentos se usan comúnmente para tratar la hipertensión, que se ha relacionado con una enfermedad COVID-19 más grave. ¿Los inhibidores de la ECA afectan el riesgo de las personas?

"ACE y ACE2 funcionan en la misma vía, pero en realidad tienen diferentes propiedades bioquímicas", advierte Ordovas-Montanes. "Es una biología compleja, pero será importante comprender el impacto de los inhibidores de la ECA en la respuesta fisiológica de las personas al virus".

También es demasiado pronto para intentar relacionar los hallazgos del estudio con la "tormenta de citocinas", una respuesta inflamatoria descontrolada que se ha informado en pacientes con COVID-19 muy enfermos. Las citocinas son una familia de sustancias químicas que activan las respuestas inmunitarias del cuerpo para combatir las infecciones, y el interferón es parte de la familia.

“Puede ser que estemos viendo una tormenta de citocinas debido a que el interferón no pudo restringir el virus para empezar, por lo que los pulmones comienzan a pedir más ayuda. Eso es exactamente lo que estamos tratando de entender en este momento ".


Inmunohistoquímica (IHC)

La inmunohistoquímica es una técnica que se utiliza para determinar la presencia y el nivel de proteínas celulares específicas. IHC mide la expresión de proteínas utilizando anticuerpos especialmente marcados que pueden unirse a las proteínas de interés. El anticuerpo se mezcla con los componentes celulares del tumor. Después de un período de tiempo determinado, la mezcla se enjuaga y solo quedan los anticuerpos unidos a sus proteínas objetivo. La presencia de los anticuerpos se puede detectar observando la muestra bajo un microscopio porque las áreas que contienen anticuerpos unidos aparecerán de un color diferente al de las áreas que carecen de anticuerpos. Las muestras con más proteína se unirán a más anticuerpos y, por lo tanto, aparecerán más oscuras. Esto permite que la prueba revele no solo si una proteína está presente sino también la relativa Monto de la proteína. Los resultados de la prueba se basan en la fuerza de la tinción y el porcentaje de células teñidas.

La IHC es una técnica de uso común porque es económica de realizar, no requiere equipo especial y, en general, es bastante precisa.413

Como ejemplo, tres proteínas de particular interés para el cáncer de mama son HER2, el receptor de estrógeno (ER) y el receptor de progesterona (PR).

HER2 es un receptor de factor de crecimiento ubicado en la superficie de las células mamarias. Aproximadamente el 30% de las pacientes con cáncer de mama tienen tumores que expresan una gran cantidad de HER2. El medicamento contra el cáncer Herceptin® está dirigido a esta proteína, lo que hace que la determinación precisa de la presencia o ausencia de esta proteína en un tumor sea un paso importante para determinar el tratamiento adecuado.
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los ER la proteína es otro receptor del factor de crecimiento. La proteína ER se une a la hormona sexual femenina estrógeno y desempeña un papel importante en la estimulación de la división celular en las células mamarias. Debido a que los medicamentos que interfieren con la señalización de estrógenos son una herramienta importante en el tratamiento del cáncer de mama, la determinación precisa de los niveles de RE es importante para el diseño de planes de tratamiento.
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los PR La proteína es el receptor de la hormona sexual femenina progesterona. Si bien no existen terapias dirigidas contra la proteína PR, la presencia o ausencia del receptor en las células cancerosas es un factor para determinar el pronóstico de la enfermedad. Más información sobre ER y PR

La inmunohistoquímica (IHC) es un método para detectar proteínas en las células. Las proteínas que se unen a la diana se agregan a las células y luego se agregan proteínas coloreadas. Si el objetivo está presente, el color se detectará con un microscopio u otra máquina.


¿Qué es el receptor de LDL?

Todo el mundo necesita una determinada cantidad de colesterol para estar sano. La mayor parte del colesterol es producido por nuestro cuerpo y otro colesterol ingresa a nuestro cuerpo en los alimentos que comemos. Un componente principal del manejo del colesterol en el cuerpo es el receptor de lipoproteínas de baja densidad, también conocido como receptor de LDL.

¿Qué hace el receptor de LDL?

Los receptores de LDL que funcionan mal pueden causar una acumulación de colesterol en las arterias.

La función principal de los receptores de LDL es mantener la cantidad de colesterol en la sangre a un nivel normal. Los receptores de LDL se encuentran en el exterior de muchas células diferentes. Cuando las lipoproteínas de baja densidad, a veces denominadas colesterol "malo", circulan por el cuerpo, los receptores de LDL las recogen y las introducen en la célula. Una vez que los receptores de LDL terminan de introducir las LDL en la célula, vuelven a la superficie de la célula para recoger más LDL y repiten el proceso una vez más.

Dentro de la célula es donde las LDL crean colesterol. El colesterol es una sustancia grasa y cerosa que ayuda a que el cuerpo funcione correctamente. Cuando el colesterol está dentro de nuestras células, es utilizado por la célula, almacenado o expulsado del cuerpo.

Muchos de nuestros receptores de LDL se encuentran en el hígado. El hígado trabaja duro para eliminar el colesterol innecesario. Cuantos más receptores de LDL, más rápido se elimina el colesterol LDL del cuerpo.

¿Cómo pueden afectar las mutaciones genéticas al receptor de LDL?

Una mutación en el gen del receptor de LDL puede resultar en colesterol elevado. Cuando los receptores de LDL no funcionan correctamente, el LDL permanece en el torrente sanguíneo más tiempo del que debería. Luego, el LDL ingresa a las paredes de las arterias, donde puede endurecer y estrechar los conductos de las arterias.

La hipercolesterolemia familiar (HF) es un trastorno hereditario que provoca la presencia de niveles altos de LDL en el cuerpo y es un trastorno que a menudo es causado por un gen del receptor de LDL mutado. La HF puede provocar enfermedades cardiovasculares tempranas y ataques cardíacos a una edad temprana. Debido a los altos niveles de LDL, la FH puede tener el síntoma de depósitos de grasa en la piel y los tendones.

¿Qué debe hacer si tiene HF?

Una dieta rica en verduras, frutas y cereales integrales puede reducir los niveles de LDL.

Desafortunadamente, menos del 10% de las personas que tienen HF saben que les afecta. La mayoría de las personas con HF no saben que tienen esta afección y es posible que no se den cuenta hasta que hayan sufrido un ataque cardíaco.

Aunque la FH nunca desaparece y el receptor de LDL en una persona afectada nunca funcionará correctamente, existen pasos que se pueden tomar para mejorar los niveles de colesterol. Alguien con HF debe asegurarse de que está haciendo la cantidad adecuada de ejercicio según lo recomendado por su médico. También deben seguir una dieta saludable para el corazón. No fumar y mantener la presión arterial en niveles seguros también son cambios importantes en el estilo de vida. Un médico también puede recetar medicamentos para controlar los niveles de colesterol debido a la FH y a los receptores de LDL que funcionan mal.


¿Cómo se expresan y detectan los receptores GLP-1? - biología

El sentido del gusto se estimula cuando los nutrientes u otros compuestos químicos activan células receptoras especializadas dentro de la cavidad bucal. El gusto nos ayuda a decidir qué comer e influye en la eficacia con la que digerimos estos alimentos. Las habilidades del gusto humano han sido moldeadas, en gran parte, por los nichos ecológicos que ocuparon nuestros ancestros evolutivos y por los nutrientes que buscaban. Los primeros homínidos buscaban nutrición en un entorno de bosque tropical cerrado, probablemente comiendo principalmente frutas y hojas, y los primeros homínidos abandonaron este entorno para ir a la sabana y ampliaron enormemente su repertorio dietético. Habrían utilizado su sentido del gusto para identificar alimentos nutritivos. Los riesgos de hacer una mala selección de alimentos al buscar comida no solo implican un desperdicio de energía y daño metabólico por comer alimentos con bajo contenido de nutrientes y energía, sino también la ingestión dañina y potencialmente letal de toxinas. Las consecuencias aprendidas de los alimentos ingeridos pueden guiar posteriormente nuestras elecciones de alimentos en el futuro. Las habilidades gustativas evolucionadas de los seres humanos siguen siendo útiles para los mil millones de seres humanos que viven con una seguridad alimentaria muy baja al ayudarles a identificar los nutrientes. Pero para aquellos que tienen fácil acceso a alimentos sabrosos y ricos en energía, nuestra sensibilidad por los alimentos azucarados, salados y grasos también ha ayudado a causar enfermedades relacionadas con la nutrición, como la obesidad y la diabetes.


Reflejos y respuestas al estrés

Un argumento que a veces se usa para sugerir que un feto puede experimentar dolor antes del tercer trimestre es que un feto puede tener un reflejo de abstinencia o la capacidad de alejarse de algo cuando se toca.

Pero realizar una acción refleja y percibir el dolor son dos cosas diferentes, dijo Davis. Considere, por ejemplo, cuando un médico pone a prueba sus reflejos golpeando su rodilla con un martillo de goma. Su pie saldrá, sin importar si siente dolor o no.

"Muchos reflejos ocurren a nivel de la médula espinal" y no involucran al cerebro en absoluto, dijo Davis. Pero el cerebro es esencial para percibir el dolor, dijo. [5 hechos dolorosos que necesitas saber]

Another argument is that a fetus in the second trimester can display certain stress responses, such as increased levels of stress hormones, including cortisol and endorphins. However, the authors of the JAMA review noted that these hormones aren't specific to pain (for example, other stressful conditions may affect their levels). In addition, the hormones are not regulated by the part of the brain associated with consciousness, the authors wrote.


Leptin


Figure 5. Recombinant leptin standard accurately determines leptin concentrations in biological matrices.


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Adiponectin ELISA Kit X X X
AMP'D®, GLP-1 ELISA Kit X X
Annexin V ELISA Kit X
Bcl-2 ELISA Kit X
Gastrin I ELISA Kit X
Insulin ELISA Kit X X
KIM-1 ELISA Kit X X
Leptin ELISA Kit X
NGAL ELISA Kit X X X X
p53 ELISA Kit X
Proinsulin ELISA Kit X
Vitamin D ELISA Kit X X X

Table 1. Detection kits of metabolic analytes.


Metabolic biomarkers play an important role both in diagnosis and prognosis. In addition to Immunoassays, we offer many antibodies, proteins, and small molecules for metabolic research. Please contact our Technical Support Team for further assistance.


Ver el vídeo: How to Use Your GLP-1 Agonist Pen (Agosto 2022).